Bangkhunprom , Phranakorn Bangkok, Thailand

การกำจัดขั้นตอนการล้างในกระบวนการสังเคราะห์เปปไทด์ด้วยเทคนิค SPPS

ทางบริษัท CEM ได้พัฒนาขั้นตอนการสังเคราะห์เปปไทด์ด้วยเทคนิค Solid phase peptide synthesis (SPPS) โดยการตัดขั้นตอนของการล้างในระหว่างแต่ละรอบการเติมกรดอะมิโน ซึ่งใช้หลักการของการระเหยของสารละลาย Fmoc deprotection base โดยการเพิ่มอุณหภูมิ และมีการป้องกันการควบแน่นของไอสารระเหยที่บริเวณผนัง vessel ด้วยระบบ Headspace gas flushing กระบวนการนี้ได้ทดสอบว่าสามารถทำงานได้ทั้งในระดับงานวิจัยสำหรับเครื่อง Liberty PRIME 2.0 รวมไปถึงในระดับการผลิตสำหรับเครื่อง Liberty Pro โดยไม่ส่งผลต่อคุณภาพของสายพอลีเปปไทด์ที่สังเคราะห์ได้ ถึงแม้ว่ามีความยาวของสายพอลีเปปไทด์จะแตกต่างกัน (ความยาวกรดอะมิโนมากสุดถึง 84 ตัว) 

ผลการทดลองชี้ให้เห็นว่า กระบวนการสังเคราะห์เปปไทด์ด้วยเทคนิคนี้มีความรวดเร็วและให้พอลีเปปไทด์ที่มีความบริสุทธิ์สูง นอกจากนี้ยังสามารถลดปริมาณของเสียจากกระบวนการได้มากถึง 95% ในทุกขนาดการสังเคราะห์ และใช้สารละลาย deprotection base เพียง 10–15% ของปริมาณเดิม การปรับปรุงเหล่านี้ถือเป็นก้าวสำคัญในการผลิตเปปไทด์คุณภาพสูง และช่วยให้การเข้าถึงยาเปปไทด์มีความเป็นไปได้มากขึ้น

รูปที่ 1 แสดงปฏิกิริยาระหว่างกระบวนการ Wash-free bulk evaporation SPPS โดยใช้แก๊สไนโตรเจนผ่าน Headspace flushing gas เพื่อกำจัดไอระเหยของ pyrrolidine ในขั้นตอนของ deprotection

รูปที่ 2 แสดงการเปรียบเทียบความบริสุทธิ์ของ Crude ระหว่างการสังเคราะห์แบบ Wash-free และแบบ Wash ของ a. Peptide synthesis b. Protein synthesis โดยทุก Chromatograms ตรวจวัดที่ความยาวคลื่น 214 nm JR: WFTTLISTIM-NH2; MW=1211Da; ACP: VQAAIDYING-OH; MW= 1063Da; Liraglutide: HAEGT-FTSDVSSYLEGQAAK(γ-E-palmitoyl)-EFIAWLVRGRG OH; MW=3751Da; Semaglutide: HXEGTF-TSDVSSYLEGNAAK (C18 diacid-γ-E-OEG OEG)-EFIAWLVRGRG-OH, where X=Aib; MW=4113Da; β-amyloid: DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA-OH; MW=4514Da; Proinsulin: FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKTRREAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLA LEGSLQKRGIVEQCCT-SICSLYQLENYCN-NH2; MW=9394Da; Barstar: KKAVING EQIRSISDLHQTLKKELALPEYYGENLDALWDCLTGWVEYPLVLEWRQFEQSKQLTEN GAESVLQVFR-EAKAEGCDITIILS-NH2;MW=10210Da.